想檢測實驗樣本中的靶蛋白,但是ELISA、WB、IHC傻傻分不清,到底應該選擇哪種方法呢?又該如何開展實驗呢? 本文總結整理了ELISA、WB、IHC的標準實驗流程,幫大家順利搞定實驗!
鎳-瓊脂糖凝膠FF主要用于純化帶組氨酸標簽(His-Tag)的重組蛋白。純化原理是利用重組蛋白組氨酸標簽的咪唑環可與過渡金屬Ni2+形成穩定的配位鍵,因此能特異、牢固、可逆地吸附于固定這些金屬離子的基質,結合了His-Tag重組蛋白的鎳-瓊脂糖凝膠FF一般通過增加咪唑濃度進行競爭洗脫。
親和層析是一種通過分子間的特異性識別和相互作用來分離純化物質的層析方法。如酶與底物、抗原和抗體之間專一的相互作用等。將其一作為配基固定在填料上,就可以從初始樣品中吸附相應的生物分子,然后通過合適的洗脫將其解離達到純化的目的。
離子交換層析是基于蛋白質和離子交換層析介質之間的電荷相互作用進行分離。離子交換層析介質通常帶有正或負電荷,吸附帶有相反電荷的蛋白質。通過調整緩沖液的離子濃度或pH值,可以改變蛋白質與介質的結合強度,實現不同蛋白質的分離。