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應(yīng)用范圍：實(shí)時(shí)定量 PCR、高分辨率溶解曲線(xiàn)

產(chǎn)品參數(shù) 

λabs/λem = 500/530 nm (結(jié)合 DNA)

λabs = 471 nm (未結(jié)合 DNA)

儲(chǔ)存條件：4℃ 或-20℃，避光保存，有效期 1 年。

產(chǎn)品介紹 

Super EvaGreen?是一種用于實(shí)時(shí)定量 PCR（qPCR） 的 DNA 結(jié)合染料。該染料的諸多優(yōu)點(diǎn)使它遠(yuǎn)勝于 SYBR Green I。除了有相似的光譜特性，Super EvaGreen 有三個(gè)主要特點(diǎn)使它區(qū)別于 SYBR Green I。

首先，Super EvaGreen?對(duì) PCR 的抑制性遠(yuǎn)小于 SYBR Green I。因此，使用 Super EvaGreen?進(jìn)行的 qPCR 實(shí)驗(yàn)可以使用快速 PCR 步驟。同時(shí)，Super EvaGreen?在實(shí)驗(yàn)中可以使用較高的濃度，從而獲得遠(yuǎn)強(qiáng)于 SYBR Green I 擴(kuò)增信號(hào)。較高濃度的 Super EvaGreen?也消除了“染料重 分布”的缺陷，使 Super EvaGreen?既可用于多重 PCR，也可用于高分辨率（高清晰）溶解曲線(xiàn)分析（HRM）。該分析正被越來(lái)越多的用于 PCR 后的基因分型和異源雙鏈分析。 由于 SYBR Green I 對(duì) PCR 的抑制性，從而要求其使用濃度必須很低，因此 SYBR Green I 無(wú)法解決由低濃度造成的 染料重分布問(wèn)題，既不能用于多重 PCR 也不能用于 HRM。 同時(shí)，染料重分布問(wèn)題也可能影響常規(guī)熔解曲線(xiàn)的可靠性， 因?yàn)榈腿埸c(diǎn)的 DNA 鏈可能由于這種原因而無(wú)法檢測(cè)到。

第二，Super EvaGreen?的穩(wěn)定性極強(qiáng)。在正常的儲(chǔ)存、操作和 PCR 過(guò)程中不會(huì)被破壞。在緩沖溶液中的染料可以安全的儲(chǔ)存在室溫或冰箱里，也可以反復(fù)凍融。與之相反，SYBR Green I 不穩(wěn)定而且降解后對(duì) PCR 抑制性更強(qiáng)。

第三，Super EvaGreen?降低了細(xì)胞膜透性，因而比 SYBR Green I 更加安全。獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室的測(cè)試結(jié)果顯示，Super EvaGreen?既沒(méi)有誘變性也沒(méi)有細(xì)胞毒性。相反，雖然 SYBR Green I 本身誘變性很弱，但它在細(xì)胞中可能抑制了正常 DNA 的修復(fù)機(jī)制，使其有誘變?cè)鰪?qiáng)作用。考慮到 PCR 的廣泛使用，其安全性應(yīng)該足夠重視。

使用方法 

1. 如下建立實(shí)驗(yàn)體系：（僅供參考） 

2000 × Super EvaGreen?儲(chǔ)液先用去離子水稀釋 100 倍，制備成 20 × Super EvaGreen?的工作液。

實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簩?shí)時(shí)定量 PCR 檢測(cè) 2000 × Super EvaGreen?