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BN14073-5mg
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BN14073-5 x 1mg
5 x 1mg
¥3200.00
BN14073-1mg
1mg
¥720.00
產品描述
應用范圍:神經熒光染料
產品參數
外觀:可溶于水的紫色固體
Abs/Em (in MeOH): 543/- nm, (emission in MeOH is too weak to measure)
Abs/Em (in membranes) :510/750 nm
貯存條件:-20℃避光保存
保質期:12 個月
分子式:C30H45Br2N3
分子量:607.51
產品介紹
神經末梢探針是一系列陽離子型苯乙烯基熒光染料,用于跟蹤神經肌肉連接或突觸的突觸活動。這類染料通常具有親脂性尾部(兩個碳鏈)和帶陽離子的高親水性頭部。 NerveRed 系列探針是具有三個雙鍵的染料。
陽離子苯乙烯基染料是通過活性依賴性染色突觸小泡來發揮功能。染料與細胞或組織共孵育時,染料的水相部分沒有熒光,而染料的親脂性尾部插入細胞膜并呈現強熒光。神經刺激后,在進行胞吞作用時,染料被包裹在囊泡內,因此,洗去細胞表面附著的染料后,熒光信號強弱表示新形成 的囊泡的數量的多少。反之,在胞吐作用時,染料與神經遞質一起從囊泡釋放,導致熒光信號減少。因此,熒光強度的變化反映了胞吞/胞吐或突觸活動的情況。內吞過程中熒光增加的速率——“結合速率”和胞吐過程中熒光減少的速率 ——“解離速率”因染料種類而異。通常,具有較長親脂性尾部和更多雙鍵的染料對膜具有較高的親和力,因此具有較高的結合速率和較低的解離速率。
NerveRed C2 染料不能用于固定細胞染色,固定細胞的染色可選擇 NM 系列染料。
實驗操作
以下是蓋玻片上培養的神經元細胞的神經末梢染色方案。
神經末梢染料也可用于標記非神經元細胞類型的內吞囊泡。染色可以在 4℃進行以選擇性標記質膜; 在室溫或 37℃下,染料的內吞通常在 10 min 內發生??梢允褂?Tyrode 溶液或其它緩沖液,可選擇性添加鈉離子通道阻斷劑河豚毒 素(TTX),其目的是阻斷動作電位,防止染色后的突觸囊泡釋放。用于特定實驗的最佳方案需要由實驗者摸索。
1. 在 50 mM Tyrode 溶液中稀釋神經末梢染料至最終濃度為 4 μM。在室溫下將含有細胞的蓋玻片置于該溶液中 1 min,使細胞完全浸沒。
2. 將蓋玻片轉移至 Tyrode + 0.5 μM 河豚毒素(TTX)溶液中,室溫下孵育 1 min。
3. 室溫下,用 Tyrode + 0.5 μM TTX 溶液反復多次洗滌蓋玻片。
4. 熒光顯微鏡下拍照觀察。
圖. FM4-64 在脂質體中的吸收和發射光譜。