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BN14060-1 mg
1 mg
¥2600.00
產品描述
應用范圍:細胞膜熒光染料、細胞追蹤與長期示蹤
產品參數
分子式:C68H105Cl2N3O
分子量:1051.5
CAS 號:180854-97-1
Ex/Em: 553/570 nm
分子結構圖:
貯存條件 -20℃ 避光保存,保質期 12 個月。
產品介紹
Cell TrackerTM CM-DiI 是 DiI 的衍生物,在水中的溶解性比 DiI 好。它可以自由穿過細胞膜進入細胞,轉化為細胞膜不可滲透的反應產物。Cell TrackerTM CM-DiI 染料通過 幾代培養保留在活細胞中。Cell TrackerTM CM-DiI 染料至少能穩定發出 72 h 的熒光,具有理想的跟蹤性能,且擁有性質穩定,工作濃度無毒性,良好的細胞保留性等優點,在生理 pH 條件下可具有明亮的熒光。此外,Cell TrackerTM CM-DiI 染料的激發和發射光譜與 GFP(綠色熒光蛋白)光譜充分分離,可以多種顏色復用。
Cell TrackerTM CM-DiI 包含一個溫和的巰基反應氯甲基取代基,該取代基通過與含巰基的肽和蛋白質共價結合,從而可以與含醛基的固定劑交聯,固定后染色信號不會丟失。相比于 DiI 等非共價結合的染料,更適合于固定細胞的染色。
使用方法
1. 染色液制備
(1)配置 DMSO 或 DMF 儲存液:儲存液用 DMSO 或 DMF 配置成濃度 1-2 mg/mL 的儲液。
注:未使用的儲存液分裝儲存在-20℃,避免反復凍融。
(2)工作液制備:用合適的緩沖液(如:無血清培養基, HBSS 或 PBS)稀釋儲存液,配制濃度為 1~2 μM 的工作液。
注:工作液最終濃度建議根據不同細胞系和實驗體系來優化。建議從推薦濃度的 10 倍范圍內開始最優濃度的摸索。
2. 細胞染色
建議將細胞用工作液在 37℃ 下孵育 5 min 左右,然后 在 4℃再孵育 15 min。在較低的溫度下孵育可減慢胞吞作用從而減少染料標記細胞質囊泡,只標記細胞膜。標記完成后,用 PBS 清洗細胞,并在新鮮培養基中重懸。對于貼壁細胞,貼壁培養時進行標記比消化成懸液后標記,細胞生存力更高。以下為可選步驟:
Cell TrackerTM CM-DiI 染色兼容后續的固定和透化。a. 固定。用 3.7% 多聚甲醛 in PBS,室溫條件下固定 10 min。 b. 透化。用丙酮在-20℃下透化 10 min。
注意事項
1. 熒光染料存在淬滅問題,請盡量避光,以減緩熒光淬滅。
2. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。