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產品描述
產品描述:
本制品是將 PCR 反應所需的 Taq 酶、dNTPs、MgCl2 以及反應緩沖液預先配制成 2 倍濃度的混合物。2×PCR Master 專為常規 PCR 擴增反應優化,擴增長度可達 8kb, 能對 4kb 及其以下長度的片段進行高效地擴增。使用時只 需再加入模板和引物并稀釋到 1 倍濃度即可進行 PCR 反 應,大大地簡化了操作過程,減少了 PCR 操作過程中的 污染。經測試,染料的加入不影響 PCR 反應,在 PCR 反 應完成后可直接電泳,節省時間。
產品特點:
高效:以λ DNA 為模板,擴增長度可達 8kb,能高效 擴增≤4kb 片段。
靈敏:可從 0.05ng 人基因組 DNA 模板中擴增出特定 基因片段。
穩定:反復凍融幾十次,4℃放置 30 天,室溫放置一 周后,擴增性能不受影響。
快捷:PCR 反應所必需試劑全集于一管之中,數分鐘 即可完成反應體系配制。
便利:PCR 反應后可直接電泳(含染料形式)。
產品用途:
1)常規 PCR 鑒定;
2)小片段目標基因克隆;
3)平端 PCR 產物加 A。
使用建議:
使用本試劑擴增得到的 PCR 產物 3′端有一突出"A" 堿基,可直接克隆于 T 載體中。
保存溫度:-20℃
質量保證:
經檢測無外源核酸酶殘留,qPCR 方法檢測無大腸桿菌 DNA 殘留,能有效擴增人基因組中的單拷貝基因。
常用反應體系(50μ l)
常用 PCR 循環
注意事項:
1) 需要溶解完全后使用,防止離子濃度不均勻。
2) 應根據實驗目的選擇合適的循環數,循環數過少,會 造成擴增量不足;循環數過多,擴增量增加,但突變率也會增加,并造成特異性擴增。
3) 根據引物 Tm 值設置合適退火溫度,退火溫度過低, 會造成非特性擴增,過高可能擴增不到。