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百瑞極——離心柱法核酸提取試劑盒

以往實驗室的核酸提取常用苯酚氯仿抽提法,但由于使用了苯酚、氯仿等試劑,毒性較大,長時間操作對人員健康有較大影響,而且核酸的回收率較低,損失量較大,由于操作體系大,不同實驗人員操作重復(fù)性差,不利于保護核酸,很難進行微量化的操作。現(xiàn)在為大家介紹離心柱法核酸提取試劑盒產(chǎn)品。



圖片

離心柱法提取原理




離心柱法核酸提取試劑盒產(chǎn)品特點:


安全低毒:試劑盒基于硅膠柱純化技術(shù),提取過程中無需使用有毒的酚、氯仿抽提。


操作簡便:30~40 min 內(nèi)完成數(shù)個樣品的DNA/ RNA 提取; 


DNA提取試劑盒: 

DNA純度高:提取的基因組 DNA 片段完整、純度高,可直接用 于下游 PCR 擴增、qPCR、分子標記以及文庫構(gòu)建等實驗。


RNA提取試劑盒:

高效去除基因組 DNA:采用膜過濾及 DNase I 消化,高效去除基因組 DNA; 


RNA 純度高:提取的 RNA 無雜質(zhì)殘留,適用于對純度、完整性要求很高的下游實驗。

沒有蛋白和其他雜質(zhì)的污染,可直接 用于 RT-PCR、Northern Blot、Poly A 純化、核酸保護和體外翻譯等實驗。




DNA提取常見問題


1.柱子出現(xiàn)堵塞?

1) 樣品用量過多。建議按照說明書推薦量進行提取; 

2) 樣品富含多糖多酚類物質(zhì)。處理富含多糖多酚的組織,推薦用專用試劑盒; 

3) 離心溫度過低。本產(chǎn)品使用操作均在室溫下進行。 


2.DNA 提取得率低?

1) 樣品用量過少。建議按照說明書推薦量進行提??;

2) 樣品材料質(zhì)量不好。盡量選用新鮮組織樣品,樣品采集后應(yīng)液氮速凍,然后置于-80℃保存,建議 盡快提取,避免反復(fù)凍融; 

3) 樣品裂解不充分。若樣品過量則適當減少樣品量,加入 Buffer GP1 后需渦旋振蕩 1min 使其充 分混勻,可適當延長裂解時間。 


3.提取的 DNA 中有 RNA 污染? 

1) 未加入 RNase A 消化。請按照說明書要求加入 RNase A 消化; 

2) 樣品中 RNA 含量過多。可適當增加 RNase A 用量或延長消化時間。



RNA提取常見問題


1.柱子出現(xiàn)堵塞? 

處理方法同DNA提取常見問題Q1。


2.提取的 RNA 出現(xiàn)降解? 

1) 樣品用量過多。影響裂解液的裂解能力,造成 RNase 未被充分抑制,導(dǎo)致 RNA 降解,建議參考 說明書推薦取樣量,若要增加樣品起始量,則后續(xù)實驗中各溶液量均要按等比例增加。對于內(nèi)源 RNase 含量較多的組織應(yīng)減少樣品量,適當增加裂解液用量; 

2) 樣品保存不當。反復(fù)解凍會引起 RNA 降解,盡量使用新鮮樣品或者解凍次數(shù)不超過 2 次的樣品; 

3) 操作過程中引入 RNase 污染。請使用 RNase-Free 的工具、試劑和耗材; 

4) 電泳過程中發(fā)生降解。使用 RNase-Free 的 Loading Buffer、瓊脂糖和電泳緩沖液等。 


3.RNA 得率低? 

1) 樣品用量過多。樣品過量會影響裂解效果,建議按照說明書要求適量取樣; 

2) 樣品裂解不充分。請按照說明書的要求進行充分研磨、裂解; 

3) 洗脫不充分。RNase Free H2O 需直接加到膜中央,并靜置 2 min 后再離心,必要時可進行二次 洗脫以提高產(chǎn)量; 

4) 吸附柱有乙醇殘留。使用 Buffer PRW1 漂洗后需要開蓋晾干吸附柱中的乙醇。


4.提取的 RNA 中有 DNA 污染? 

1) 樣品用量過多。超出試劑盒規(guī)定的樣本量影響裂解液的裂解能力可能會導(dǎo)致基因組的污染; 

2) 次生代謝物較多。次生代謝物含量高的樣本在提取 RNA 時易出現(xiàn)基因組的污染; 

3) 操作過程中需要進行去除基因組 DNA 的操作,若 DNA 含量較多,可延長 DNase I 消化時間或重復(fù)消化。



核酸提取產(chǎn)品信息


圖片


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※ 本頁面產(chǎn)品僅供研究用,研究以外不可使用。

 

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